Dans les études expérimentales telles que la biochimie et la biologie moléculaire,La solution tampon CAPS (3-cyclohexylamine-1-propanesulfonique) est souvent utilisée dans des expériences telles que l'électrophorèse des protéines et la détermination de l'activité enzymatique en raison de ses bonnes propriétés tamponCependant, dans l'utilisation réelle, les chercheurs reçoivent souvent des rappels pour "éviter la congélation et le dégel répétés".les propriétés chimiques de la solution tampon CAPS, les changements physiques pendant la congélation et la décongélation, et l'impact potentiel sur les résultats expérimentaux.
1Caractéristiques et mécanisme d'action de la solution tampon CAPS
Le CAPS est un tampon biologique couramment utilisé.qui peut maintenir la stabilité relative du pH de la solution dans un environnement alcalin par dissociation et protonationLorsque des substances acides ou alcalines sont ajoutées à la solution tampon CAPS, les molécules CAPS se lient ou libèrent des protons en conséquence.et régler la concentration d'ions hydrogène dans la solution par leur propre équilibre de dissociation, contrôlant ainsi la valeur du pH dans une certaine plage.
2Effets physiques de la congélation et du dégel répétés sur la solution tampon CAPS
Lorsque la solution tampon CAPS est congelée, l'eau qui s'y trouve se cristallise progressivement pour former des cristaux de glace.mais pousse de préférence au bord de la solution et dans les zones où des impuretés existentAu fur et à mesure que les cristaux de glace continuent de s'élargir, les solutes de la solution seront pressés dans la zone de solution non gelée, ce qui entraînera une augmentation locale de la concentration de soluté.Pendant le processus de décongélation, les cristaux de glace fondent et le volume de la solution est rétabli, mais à ce moment la distribution des solutes à l'intérieur de la solution n'est plus uniforme.La congélation et la décongélation répétées provoquent une répétition continue de ce processus., et le volume de la solution se dilate et se contracte fréquemment, détruisant l'uniformité de la solution.
3Effets chimiques de la congélation et du dégel répétés sur la solution tampon CAPS
(I) Diminution des performances de la mémoire tampon
La congélation et le dégel répétés peuvent détruire la structure et la stabilité des molécules CAPS.les fluctuations de la concentration de solutes et les effets mécaniques des cristaux de glace pendant le processus de congélation et de décongélation peuvent provoquer une dégradationCes changements modifieront les caractéristiques de dissociation des molécules CAPS, en affaiblissant ou même en perdant leur capacité de tamponnage.Lorsque les performances de mise en mémoire tampon diminuent, la solution tampon CAPS ne peut pas maintenir efficacement la stabilité du pH face à des changements acides-basiques externes, ce qui affecte les résultats expérimentaux qui en dépendent pour fournir un environnement stable.
(II) Réaction chimique avec d'autres composants
De nombreuses solutions de tampon CAPS ajouteront d'autres composants lorsqu'elles seront prêtes à répondre à différents besoins expérimentaux.La congélation et la décongélation répétées peuvent favoriser des réactions chimiques entre ces composants ou entre les molécules de CAPSCertains composants sensibles à la température peuvent se décomposer pendant le processus de congélation et de décongélation, produisant de nouvelles impuretés.qui peuvent interférer avec les molécules biologiques du système expérimental et provoquer des écarts dans les résultats expérimentaux.
4 L' incidence de la congélation et de la décongélation répétées sur les résultats expérimentaux
L'utilisation de solutions tampons CAPS qui ont été congelées et décongelées à plusieurs reprises peut entraîner de grandes erreurs dans les résultats expérimentaux.des environnements à pH instable peuvent affecter la charge et l'activité des protéines, rendant imprécises la séparation, la purification et l'identification des protéines.mais la direction de l'expérience peut aussi être induite en erreur.
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