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Quelles conditions le réactif chimioluminescent utilisé comme étiquette doit-il remplir?
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Dans le domaine de la bioanalyse moderne et du diagnostic médical,L'immunodétection par chimioluminescence (CLIA) est devenue une méthode de détection indispensable avec ses nombreux avantages tels qu'une sensibilité élevée et une forte spécificité.En tant qu'élément central de cette technologie, les performances du réactif chimioluminescent utilisé comme étiquette déterminent directement les résultats des essais.Parlons des conditions clés que le réactif chimioluminescent utilisé comme une étiquette doit répondre.

 

1Capacité à participer à des réactions chimioluminescentes
1) Principe de base de la réaction: les réactifs chimioluminescents doivent avoir les caractéristiques inhérentes de pouvoir participer à des réactions chimioluminescentes,qui est la racine de la génération de signaux de détectionPrenez l'ester d'acridinium comme exemple. En tant que substrat luminescent relativement idéal, il peut être oxydé par le peroxyde d'hydrogène dans un environnement alcalin pour émettre de la lumière.Cette réaction redox implique le transfert d'électrons, la rupture et la formation de liaisons chimiques, et conduit finalement à la libération d'énergie sous forme de lumière.comme le groupe actif d'ester dans l'ester d'acridiniumIls peuvent interagir spécifiquement avec les oxydants pour déclencher le mécanisme de luminescence.Ce n'est qu'avec une telle réactivité que le réactif chimioluminescent peut générer des signaux lumineux en temps opportun et avec précision dans le système d'immunologie en fonction de l'événement de liaison spécifique de l'antigène-anticorps..

 

2) Impact sur la sensibilité de détection: l'efficacité du réactif dans la réaction chimioluminescente est étroitement liée à la sensibilité.Une réactivité élevée signifie que le processus de luminescence peut être rapidement démarré en présence d'une concentration inférieure de réactifs pour produire une intensité lumineuse détectable.Dans le diagnostic clinique, pour la détection de certains biomarqueurs traces, tels que les marqueurs tumoraux et les hormones,Les réactifs chimioluminescents sont nécessaires pour pouvoir capter avec précision les changements subtils causés par la liaison antigène-anticorps., et même si la teneur cible dans l'échantillon est extrêmement faible, elle peut être réfléchie par un signal luminescent fort et stable.il peut provoquer une luminescence faible ou instable, ce qui rend difficile pour le système de détection de distinguer les signaux du bruit de fond, manquant ainsi des informations diagnostiques importantes.

 

2. Réactifs pouvant former des conjugués stables après couplage avec des antigènes ou des anticorps
Le couplage de réactifs chimioluminescents avec des antigènes ou des anticorps est une étape clé dans la construction d'un système d'immunodétection, et il est important de former un conjugué stable.Cela nécessite une technologie de couplage chimique sophistiquéePar exemple, les réactions chimiques entre groupes actifs, telles que la réaction de condensation entre groupes aminés et carboxyle, la réaction d'addition entre thiol et maléimide, etc.,peuvent être utilisés pour obtenir une connexion covalente entre les deuxAu cours du processus d'accouplement, les conditions de réaction, y compris la température, la valeur du pH, la concentration du réactif, etc.,doivent être strictement contrôlées pour assurer la sélectivité et l'efficacité de la réaction d'accouplement.
Du prélèvement des échantillons, du stockage à la détection, le conjugué doit résister à l'essai de différents facteurs environnementaux, tels que les fluctuations de température, les changements de pH de la solution, etc.Si le conjugué est peu stable, il peut se dissocier en raison de légères variations de température lors du transport de l'échantillon, provoquant la séparation du réactif chimioluminescent de l'antigène ou de l'anticorps,qui réduira non seulement la sensibilité de détection, mais peut également provoquer des résultats faux négatifs.

 

3L'effet quantique élevé et la dynamique de réaction sont toujours conservés après le couplage.
L'effet quantique détermine l'efficacité de la génération de photons du réactif chimioluminescent pendant le processus de luminescence.Le réactif après couplage doit conserver un effet quantique aussi élevé que possible, c'est-à-dire que le nombre de photons générés par unité de réaction chimique doit être élevé.métabolitesCes substances peuvent absorber et disperser la lumière, réduisant l'intensité du signal de détection.Les réactifs chimioluminescents à effet quantique élevé peuvent mettre en évidence le signal cible dans un environnement aussi complexe avec leur propre capacité de génération de photons efficace, ce qui facilite l'identification et la quantification par le système de détection.

 

4Les propriétés physico-chimiques de l'objet étiqueté ne doivent pas être modifiées ou très peu modifiées.
La protection de l'activité immunologique de l'objet étiqueté est l'un des principes fondamentaux de l'application des réactifs chimioluminescents.L'activité immunologique de l'antigène est à la base de sa reconnaissance et de sa liaison par des anticorps spécifiques., et l'activité immunologique de l'anticorps est liée à sa capacité à capturer avec précision l'antigène.Une fois que le réactif chimioluminescent modifie excessivement les propriétés physicochimiques de l'objet étiqueté au cours du processus d'accouplement, par exemple en provoquant une distorsion de la conformation de l'antigène et un bouclage du site de liaison de l'anticorps, l'affinité antigène-anticorps diminue,et même la capacité de réponse immunitaire sera perdue.

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